Polimerasa de alta fidelidad diseñada para amplificar fragmentos largos de ADN de hasta 44 kb, con alto rendimiento, ciclos rápidos y un desempeño robusto incluso a partir de cantidades ultra bajas de ADN.
Amplificación de hasta 44 kb
Compatibilidad con bajo input
Ciclos rápidos: menos de 15 seg/kb
60% de reducción en la tasa de errores frente a KAPA™ HiFi.
25%-85% compatibilidad GC
Tolerancia al uracilo
Formatos: 2X All-In-One Mix
Kit PCR
Amplifica hasta 44 kb, proporcionando plantillas de alto rendimiento listas para plataformas de secuenciación de lectura larga.
Amplifica ADN complejo a partir de tan sólo 0,1 ng y plantillas de complejidad media a partir de 5 pg.
Más de un 60% de reducción en las tasas de error, lo que proporciona una amplificación de alta precisión para aplicaciones críticas de precisión.
Amplificación uniforme y alta recuperación de ADN, incluso a partir de plantillas difíciles o ricas en GC (25%-85% GC).
Consigue una amplificación rápida con velocidades de extensión inferiores a 15 seg/kb.
Lee eficazmente a través de uracilo, apoyando tanto el análisis de metilación como los protocolos que implican ADN dañado.
DATOS DE RENDIMIENTO
Maximiza el rendimiento del fragmento objetivo con una amplificación altamente eficiente, incluso en fragmentos de hasta 44 kb de longitud.
Se realizó la amplificación de fragmentos de ADN lambda de 20 kb y 44 kb con DeCodiFi™ High-Fidelity Polymerase, KAPA HiFi, Platinum SuperFi II y Q5. Cada fragmento se amplificó a partir de una baja cantidad de ADN (1 ng). Las reacciones se llevaron a cabo bajo condiciones optimizadas para cada enzima, utilizando 24 ciclos. El experimento se realizó por triplicado.
DeCodiFi™ permite la amplificación de targets largos de ADN a partir de cantidades limitadas de templado, incluyendo la amplificación de beta globina de 17,6 kb evaluada con cantidades decrecientes de ADN.
La amplificación del gen humano de beta-globina de 17,6 kb se realizó utilizando DeCodiFi™ High-Fidelity Polymerase y KOD Xtreme™ Hot Start DNA Polymerase. Cada blanco se amplificó a partir de diferentes cantidades de ADN en reacciones de 25 μL: 1000 pg, 125 pg y 50 pg. También se incluyó un control sin plantilla (0 pg). Todas las reacciones se llevaron a cabo siguiendo las condiciones optimizadas para cada enzima y utilizando 30 ciclos. El experimento se realizó por triplicado.
DeCodiFi™ muestra una reducción del 64% en las tasas de error en comparación con KAPA™ HiFi en una comparación de fidelidad basada en librerías Illumina.
Comparación de DeCodiFi™, KAPA HiFi y Toyobo HiFi, medida en términos de mejora de pliegues sobre Taq Polymerase, basada en librerías Illumina del genoma completo de E. coli.
Concentración de ADN obtenida a partir de 25 μL de reacción PCR lambda 15 kb utilizando el kit PCR DeCodiFi™, DeCodiFi™ All-in-One Mix y enzimas de la competencia (KAPA HiFi, Platinum SuperFi II y Q5). El experimento se realizó por triplicado.
DeCodiFi™ garantiza una amplificación con bajo sesgo, incluso al utilizar diferentes buffers y en fragmentos ricos en AT o GC, logrando una cobertura más uniforme y una mayor profundidad de secuenciación.
Las librerías de Illumina preparadas a partir de un genoma común (Escherichia coli) fueron amplificadas utilizando Taq polymerase, KAPA HiFi PCR kit y DeCodiFi™ High-Fidelity PCR kit (izquierda). Las librerías de Illumina preparadas a partir de un genoma rico en AT (Staphylococcus epidermidis) y un genoma rico en GC (Streptomyces leeuwenhoekii) fueron amplificadas utilizando Taq polymerase, KAPA HiFi PCR kit y DeCodiFi™ High-Fidelity PCR kit (derecha).
APLICACIONES
Para flujos de trabajo en los que son importantes los fragmentos de ADN más largos y la amplificación de bajo input.
Para flujos de trabajo de secuenciación dirigida que requieren una amplificación precisa y consistente.
Para flujos de trabajo en los que la calidad de la amplificación y la representación de la secuencia pueden influir en el análisis genómico posterior.
APLICACIONES
Para flujos de trabajo de amplificación rutinarios y exigentes en los que la precisión y el rendimiento son importantes.
Para plantillas largas, complejas o con alto GC en las que son importantes la amplificación de alta fidelidad, el rendimiento y la eficiencia del ciclado.
